SARS-CoV-2 Nukleinsav-tesztkészlet

Rendeltetésszerű használat:

A SARS-CoV-2 nukleinsav tesztkészlet a COVID-19 nukleinsavainak kvalitatív kimutatására szolgál orrgarat-, szájgarat-tampon és köpetben. A vizsgálati eredmények molekuláris diagnosztikai alapot biztosítanak a fertőzés vagy a gyanús betegek számára, és nem használhatók a klinikai diagnózis egyetlen kritériumaként.

Anyagok:

Vizsgálati eljárás:

A. Minta előkészítés

Az extrahált RNS a SARS-CoV-2 nukleinsav tesztkészlet kiindulási anyaga.

Fontos: Minden nukleinsav-kivonási eljárást egyidejűleg kell végrehajtani egy pozitív kontrollal (40 μL, hígítsuk fel steril sóoldattal/PBS-sel a kívánt térfogatra) és egy negatív kontrollal (40 μL, hígítsuk steril sóoldattal/PBS-sel a kívánt térfogatra).

Javasoljuk, hogy a következő kereskedelmi forgalomban lévő nukleinsav extrakciós készleteket használja: PureLinkTM Viral RNA/DNS Mini Kit (Invitrogen); Viral RNA Mini kit (QIAGEN); TIANamp Hi-DNS/RNS Kit (TIANGEN);

B. Reakciókeverék beállítása

1. Használat előtt minden reagenst és mintát teljesen fel kell olvasztani, teljesen össze kell keverni és röviden centrifugálni kell szobahőmérsékleten (körülbelül 18-25 fok között).

2. Készítse elő a szükséges mennyiségű reakciókeveréket egy megfelelő méretű polipropilén mikrocentrifuga csőben.

3. Pipettázzon 25 µL reakciókeveréket egy megfelelő optikai 96-üregű reakciólemez vagy egy megfelelő optikai reakciócső minden szükséges lyukába.

C. Sablon hozzáadása

1. Adjon hozzá 5 μL mintákból/pozitív kontrollból/negatív kontrollból extrahált RNS-t. A teljes térfogat 30 μl.

2. Alaposan keverje össze a mintákat és a kontrollokat a reakciókeverékkel felfelé és lefelé pipettázva/Vortex segítségével.

3. Zárja le a 96-lyuk reakciólemezt megfelelő fedéllel vagy optikai ragasztófóliával, a reakciócsöveket pedig megfelelő fedővel.

4. Centrifugálja a 96-lyukú reakciólemezt egy mikrotiterlemez rotorral ellátott centrifugában 30 másodpercig, körülbelül 2500 fordulat/perc sebességgel.

D. A valós idejű PCR eszköz programozása

A különböző valós idejű PCR műszerek beállításával és programozásával kapcsolatos alapvető információkért olvassa el az adott műszer felhasználói kézikönyvét. A tesztet az ABI7500 Real-Time PCR rendszerhez optimalizálták. A PCR-futást az alábbi táblázatban leírt ciklusos körülmények között hajtják végre.

Határozza meg a fluoreszcencia detektorokat

*Kérjük, állítsa a műszer belső fluoreszcens referenciaértékét "Nincs" értékre, például: ABI sorozatú műszerek esetén állítsa a "Passive Reference" értéket "Nincs" értékre.

E. Adatelemzés

Kérjük, állítsa be az elemzési paramétereket és elemezze az adatokat a vonatkozó műszerek használati utasítása szerint.

Vegyük például az ABI 7500-at:

Az alapvonalat olyan tartományra kell állítani, amely kiküszöböli az erősítés korai ciklusaiban fellelhető háttérfluoreszcenciát, de nem fedi át azt a területet, ahol az erősítési jelek a háttér fölé emelkednek (Kezdő érték: 3–10; Végérték: {{2} }). A ciklusküszöbnek (Ct) az exponenciális fázis alapjában kell lennie. Kattintson az "Elemzés" gombra az elemzés eredményének automatikus lekéréséhez, és olvassa el az észlelési eredményt a "Jelentés" ablakban.

Népszerű tags: sars - cov-2 nukleinsav sav teszt kit, Kína, beszállítók, gyártók, gyár, ömlesztett